真核表达载体pcDNA 3.1-β淀粉样前体蛋白裂解酶的构建及其在COS-7 细胞中瞬时表达
发布时间:2025-04-30
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- 发布时间:
- 2025-04-30
- 论文名称:
- 真核表达载体pcDNA 3.1-β淀粉样前体蛋白裂解酶的构建及其在COS-7 细胞中瞬时表达
- 发表刊物:
- 中国修复重建外科杂志
- 摘要:
- 目的 构建B淀粉样前体蛋白裂解酶(B2site amylo id p recurso r p ro tein cleaving enzyme, BACE) 基因
的真核表达载体, 为修复阿尔茨海默病(A lzheimer’s disease, AD) 损伤神经元奠定基础。 方法 采用RT2PCR 方法, 从人的成神经细胞瘤的总cDNA 中, 扩增出1. 5 kb 的BACE cDNA 片段, 再用BamH I 和Xho I 双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA 3. 1 中, 用限制性内切酶酶切分析和DNA 序列分析鉴定重组质粒; 以免疫细胞化学法检测BACE基因的表达情况。 结果 人BACE 基因的cDNA 已克隆到真核细胞表达载体pcDNA 3. 1 质粒中; 经脂质体转染CO S27 细胞, 并由潮霉素进行筛选, 可见转染细胞胞浆中和胞膜上有较高量的BACE 蛋白表达。 结论 成功构建了pcDNA 3. 1-BACE 的真核表达载体, 为研究BACE 基因在AD 发病机制中的作用及抑制BACE, 为治疗AD 奠定一定的实验基础。
- 合写作者:
- 董炜疆,宫惠琳,冯改丰
- 卷号:
- 2006-20
- 页面范围:
- 423-426
- 是否译文:
- 否
- 发表时间:
- 2006-03-22


